RT Dissertation/Thesis
T1 Escherichia coli O157:H7 und seine Adaption an verschiedene Wachstumsbedingungen in vitro : Untersuchung des intrazellulären Proteoms und Kohlenhydratmetabolismus
A1 Polzin,Sabrina
WP 2014/10/27
AB In der vorliegenden Arbeit wurde der Zusammenhang zwischen Metabolismus und Pathogenität enterohämorrhagischer E. coli-Bakterien während des Wachstums unter verschiedenen Umweltbedingungen in vitro untersucht. Dabei konnte gezeigt werden, dass diese Umweltbedingungen sowohl das Proteom als auch das Genom beeinflussten. Experimente mit den Darmmilieu simulierenden Kulturmedien SIEM und SCEM zeigten abweichende Expressionen der Proteine und Gene im Vergleich zum Wachstum im Referenzmedium TSB. Unter anderem konnte eine Abnahme der Motilität und die Bildung von biofilmähnlichen Substanzen beobachtet werden. Unterschiede ließen sich aber auch beim Metabolismus und der Expression von Chaperonen und Stresssystemen beobachten. Ein verstärkter Glucosemetabolismus, gesteigerte Aminosäuresynthese, verstärkte Bildung von Chaperonen und die Repression von vielen stressassoziierten Proteinen, sowie die Ausprägung von Pathogenitätsfaktoren ließen sich beim Wachstum in den Kulturmedien nachweisen. Die Bedingungen in den Versuchsmedien führten beispielsweise zu einer erhöhten Säureresistenz, die den EHEC-Bakterien eine unbeschadete Passage des Intestinaltrakts ermöglicht. Aber auch Virulenzfaktoren wie die Proteine EspP und EspB konnten identifiziert werden. Zudem konnte in SCEM die Sialinsäureesterase Z1466 zusammen mit Shiga Toxin stark exprimiert gefunden werden, welche den EHEC-Bakterien im Intestinaltrakt einen Wachstumsvorteil gegenüber der intestinalen Mikroflora liefern kann. Mit Hilfe der durchgeführten Isotopolog-Profiling-Experimente durch den Kooperationspartner Dr. rer. nat. Wolfgang Eisenreich (München), konnte zudem der Einfluss auf den Glucosemetabolismus und auch die Aminosäuresynthese untersucht werden. In der vorliegenden Arbeit konnte gezeigt werden, dass eine Stressantwort und die Expression von Virulenzfaktoren auch außerhalb des humanen Wirts induziert werden kann. Sie zeigen aber auch die Komplexität der Regulation verschiedenster Vorgänge in der bakteriellen Zelle als Reaktion auf äußere Faktoren.
K1 EHEC
K1 Proteom
K1 Metabolismus
K1 Kohlenhydrate
K1 Aminosäuren
PP Hohenheim
PB Kommunikations-, Informations- und Medienzentrum der Universität Hohenheim
UL http://opus.uni-hohenheim.de/volltexte/2014/1008